研究中结核病诊断技术

由于现有结核病细菌学诊断技术存在的技术缺陷，寻找简便、快速、实用的实验诊断方法是亟待解决的问题。

多年来防治结核病工作者在细菌 学、免疫学、分子生物学等方面进行了大量的、卓有成效的努力，在结核病的实验诊断中引入了多项技术指标并取得了一定的进燕尾服。建立了一些新的技术和方法。

1．结核病的免疫学诊断技术：

近年来报道较多的主要有血清学诊断技术：这项技术起始于19世纪末，主要是检测血清内的抗结核抗菌素体。它是一种快速、简便的检查技术，并且在多种疾病的诊断中得到广泛的应用。

1976年Nassau首先将酶疫吸附试验（ELISA）法应用于结核病的免疫学诊断以后，由于这种方法具有与同位素检测相似的灵敏度并避免了同位素的，放射性污染，国内外一直没有间断这方面的研究，主要是检测结核病人血清中的特异性抗体。阳性率在70%-90%，假阳性在4%-8%，这一方法的引入促进了结核病免疫学诊断的进展。

存在的主要问题是结核菌的抗原性较弱且属间和种间共同抗原决定簇的存在及体液免疫与结核病的相关性未得到充分的阐明，致使ELISA这一血清学诊断技术难以取得实质性的进展。

2．结核病的分子生物学诊断技术：

20世纪90年代以来，随着分子生物学在医学领域取得的飞速发展，研究者也将分子生物学的原理引入了结核病实验研究范围。聚合酶链反应（PCR）是一种以核酸生物化学为基础的分子生物学诊断技术，是生物医学领域内最有价值的研究手段之一。

自1989年引入结核病的诊断以来，立即成为结核病细菌 学诊断领域中备受关注的焦点。经过数年的努力积累了大量的资料和经验，使这一方法不断完善，其反应灵敏、特异、快速的特性在多数报告中得到肯定。PCR的技术操作并不复杂，但是要求很高的技术质量。因扩增气溶胶污染而导致的假阳性和因标本中抑制物质存在而导致的假阴性和试剂盒缺乏规范化、标准化是影响PCR结果可信性的关键。

为此研究人员正在不断开发出新的高敏度和高特异性的PCR方法，如逆转录PCR法、巢式PCR法、单管巢式逆转录PCR法、实时荧光PCRE、酶联PCR等，在一定程度上提高了PCR方法的敏感性和特异性。研究者们还将分子生物学的原理应用于结核菌的耐药性测定及核酸指纹分析，在耐药基因的检测和分子流行病学方面，取得了重大的进展。